阿苯达唑与载体蛋白BSA及OVA偶联抗原的制备与应用研究
发布时间:2025-07-16 点击数:135
阿苯达唑是一种广泛应用于人和动物寄生虫治疗的苯并咪唑类驱虫药,其残留检测对食品安全和公共卫生具有重要意义。近年来,免疫分析方法因其高灵敏度和特异性成为药物残留检测的重要手段。本研究通过将阿苯达唑与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备人工抗原,为建立免疫检测方法奠定基础。
在抗原制备过程中,阿苯达唑分子需经过化学修饰引入活性基团,以便与载体蛋白共价结合。采用碳二亚胺法(EDC法)和戊二醛法作为偶联策略,优化反应条件以提高偶联效率。通过紫外光谱扫描和SDS-PAGE电泳验证偶联产物的形成,并计算结合比。实验结果表明,阿苯达唑与BSA的偶联比为12:1,与OVA的偶联比为8:1,证实了人工抗原的成功合成。
制备的偶联抗原在免疫分析中具有重要应用价值。BSA偶联物作为免疫原用于动物免疫,刺激机体产生特异性抗体;OVA偶联物作为包被原用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的建立。通过间接竞争ELISA法评估抗体灵敏度,结果显示抗血清对阿苯达唑的半数抑制浓度(IC50)为1.2 ng/mL,表明所制备的抗原具有良好的免疫原性和反应原性。
该研究为阿苯达唑残留的免疫检测提供了可靠工具。与传统的色谱分析方法相比,基于人工抗原的免疫检测技术操作简便、成本低廉,适用于大规模样本筛查。未来可进一步优化抗原设计,提高抗体亲和力,并拓展至其他苯并咪唑类药物的多残留检测领域。
综上所述,阿苯达唑与BSA及OVA的偶联抗原制备方法稳定高效,在免疫分析中展现出良好的应用潜力。该研究不仅为食品安全监测提供了新思路,也为小分子化合物的免疫检测技术开发提供了参考。
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