06-06
当杂交瘤细胞筛选成功后,下一步就是大量生产单克隆抗体。两种主流方法:体外培养法(细胞上清)和体内腹水法(小鼠腹腔)。腹水法的抗体浓度是细胞上清的100-1000倍,一升腹水的抗体量相当于...
06-06
制备高质量抗体,佐剂的选择和使用是决定成败的第一步。在众多佐剂中,弗氏佐剂(Freund‘s Adjuvant)...
06-06
在ELISA、IHC、Western blot等免疫检测实验中,背景高是最让人头疼的问题之一。很多人第一时间会想到“洗涤不够”“二抗浓度太高”,但常常忽略了一个更基础的问题——封闭没做好。
06-06
在免疫检测中,我们关注的焦点往往是抗体、抗原、标记物这些“主角”。但决定实验成败的,往往是那些看不见的“配角”——蛋白稳定剂和酶稳定剂。
06-06
谈到免疫检测中的标记物,大多数人首先想到的是HRP(辣根过氧化物酶)。它成本低、灵敏度高、操作简单,确实是“全能选手”。
06-05
双抗体夹心ELISA是检测大分子抗原最经典、最常用的方法——从炎症标志物CRP到乙肝表面抗原,都离不开这套体系。
06-05
FITC(异硫氰酸荧光素)是免疫荧光领域“最古老的绿色荧光染料”,已经服务了科学家半个多世纪。但FITC有两个众所周知的缺点——光漂白快、pH敏感。
06-05
在免疫检测中,二抗是最常见的信号放大工具。但当你的一抗来源物种非常稀有(没有对应的商业化二抗),或者你希望用一种试剂检测多个物种的抗体时,传统二抗就显得力不从心了。
06-05
商业化标记二抗(如HRP-山羊抗小鼠IgG)虽然方便,但有时满足不了特殊需求——你需要标记某个没有商业化产品的抗体,或者需要高标记比例的探针,或者只是想在实验室里快速验证一个想法。
06-05
在ELISA和Western blot实验中,HRP是最常用的标记物,而底物则是决定检测灵敏度的“最后一公里”。