BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原：乙肝表面抗原检测与信号放大的核心工具
在病毒性肝炎诊断和乙肝防控领域，乙型肝炎病毒表面抗原是乙肝感染最重要的血清学标志物，俗称“澳抗”。HBsAg阳性是判断HBV现症感染的核心指标，广泛应用于献血筛查、临床诊断和疫苗免疫效果评价。生物素标记的小鼠抗HBsAg单克隆抗体将生物素-亲和素信号放大系统与高特异性抗体相结合，可显著提高检测灵敏度，是HBsAg检测的核心工具。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原（生物素标记） |
| 宿主来源 | 小鼠 |
| 特异性 | 识别乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） |
| 标记物 | 生物素（Biotin） |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右 |
| 缓冲液成分 | 50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 保存条件 | -20℃（避光） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 流式细胞术/IF/IP | 1:200-2000 |
| IHC | 1:500-2500 |
| ELISA/Western Blot | 1:2000-20000 |
| 识别范围 | 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） |
| 信号放大系统 | 配合HRP/荧光标记的链霉亲和素使用 |
三、产品特点
-
HBsAg特异性——精准识别
特异性识别乙型肝炎病毒表面抗原，是HBV检测的核心试剂。 -
生物素标记——信号放大能力强
生物素-亲和素系统是目前最灵敏的信号放大系统之一，可将信号放大数十倍至上百倍。 -
高稀释倍数
ELISA/WB推荐稀释度1:2000-20000，经济耐用。 -
多平台兼容
适用于ELISA、化学发光、Western Blot、免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）等多种检测平台。
四、生物素标记的优势
| 特性 | 说明 |
|---|---|
| 信号放大 | 一个生物素化抗体可结合多个链霉亲和素-HRP，实现信号级联放大 |
| 灵敏度提升 | 比直接HRP标记抗体灵敏度提高5-20倍 |
| 灵活性 | 同一生物素化抗体可配合不同检测系统（HRP、荧光、胶体金） |
五、乙肝表面抗原检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 献血筛查 | 检测献血者HBsAg，防止HBV经血传播 |
| 乙肝临床诊断 | HBsAg阳性是HBV现症感染的核心指标 |
| 疫苗免疫效果评价 | 检测免疫后抗-HBs水平（需配合抗-HBs检测体系） |
| 血液制品质控 | 检测血液制品中HBsAg残留 |
| HBV基础研究 | 检测细胞/组织中HBsAg表达 |
| 抗病毒疗效监测 | 监测HBsAg水平变化（HBsAg清除是临床治愈指标） |
六、主要应用场景
1. 双抗体夹心ELISA检测HBsAg（核心应用）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗HBsAg捕获抗体（另一株） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测人血清/血浆样品 |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原（1:2000-20000稀释） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | 加TMB显色 |
2. 化学发光检测HBsAg
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗HBsAg捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测样品 |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原 |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素（或碱性磷酸酶-链霉亲和素） |
| 6 | 加入化学发光底物，读取发光值 |
3. Western Blot检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将HBsAg或含HBsAg的样品进行SDS-PAGE电泳 |
| 2 | 转膜 |
| 3 | 封闭 |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原（1:2000-20000稀释） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | ECL化学发光检测 |
预期条带：HBsAg约24kDa（P24蛋白），可能见到糖基化条带（GP27、GP30等）。
4. 免疫组化（IHC）/免疫荧光（IF）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 肝组织切片固定、抗原修复 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原（IHC:1:500-2500; IF:1:200-2000） |
| 4 | 加入HRP-链霉亲和素（IHC）或荧光-链霉亲和素（IF） |
| 5 | 显色或荧光观察 |
七、实验操作要点
1. 夹心ELISA方案（检测HBsAg）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被抗HBsAg捕获抗体（另一株，2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入人血清/血浆样品 | 室温孵育1-2小时，样品可不稀释或适当稀释 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原 | 1:2000-20000稀释，室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加入HRP-链霉亲和素 | 按说明书稀释，室温30分钟 |
| 8 | 洗涤 | 3-5次 |
| 9 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 10 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| ELISA | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| 化学发光 | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| Western Blot | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| IHC | 1:1000 | 1:500-1:2500 |
| IF | 1:500 | 1:200-1:2000 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知HBsAg阳性人血清或HBsAg标准品 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | HBsAg阴性人血清 | 评估背景 |
| 二抗对照 | 不加一抗，只加BIOTIN-二抗 | 评估非特异性结合 |
| 链霉亲和素对照 | 不加生物素化抗体，只加链霉亲和素 | 评估链霉亲和素非特异性结合 |
4. 重要操作提示
- 本产品为生物素标记抗体，必须与链霉亲和素（SA）检测系统配合使用，不可直接显色。
- HBsAg存在多种亚型（adr、adw、ayr、ayw等），本产品为广谱识别型，可检测各亚型。
- HBsAg阳性是HBV现症感染的核心标志，但需结合其他指标全面判断（如HBeAg、抗-HBc、抗-HBs等）。
- HBsAg清除是慢性乙肝临床治愈的重要指标。
- 生物素-亲和素系统可显著放大信号，适用于低丰度HBsAg检测（如窗口期样本）。
- 某些组织（肝、肾）含内源性生物素，可能产生高背景，建议使用生物素封闭试剂盒。
- 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存 |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 有效期 | 以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用 |
| 环境要求 | 请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效 |
九、常见问题
Q1：BIOTIN-小鼠抗乙肝表面抗原的主要用途是什么？
A1：主要用于ELISA、化学发光等检测体系中HBsAg的检测，适用于献血筛查、乙肝临床诊断、血液制品质控、HBV基础研究等。
Q2：HBsAg检测的临床意义是什么？
A2：
| 检测结果 | 临床意义 |
|---|---|
| HBsAg阳性 | HBV现症感染（急性或慢性） |
| HBsAg阴性、抗-HBs阳性 | 既往感染或疫苗接种后 |
| HBsAg清除 | 临床治愈的重要指标 |
Q3：本产品可以用于检测抗-HBs抗体吗？
A3：不能。本产品识别的是HBsAg抗原，而非抗-HBs抗体。如需检测抗-HBs（疫苗免疫效果评价），请使用HBsAg包被ELISA板配合HRP-抗人IgG二抗。
Q4：本产品与HRP-小鼠抗HBsAg有什么区别？
A4：
| 特性 | 本产品（生物素标记） | HRP-小鼠抗HBsAg |
|---|---|---|
| 检测系统 | 需配合链霉亲和素-HRP | 直接显色 |
| 信号放大 | 可放大5-20倍 | 无额外放大 |
| 灵敏度 | 更高 | 中等 |
| 适用场景 | 低丰度HBsAg检测、高灵敏度要求 | 常规检测 |
Q5：如何确定最佳稀释度？
A5：建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:500开始倍比稀释至1:40000，以HBsAg阳性血清为阳性对照，选择信噪比最高的稀释度。
Q6：产品如何保存？
A6：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品为生物素标记的小鼠抗乙肝表面抗原抗体，已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好、背景低，适用于ELISA、化学发光、IHC、IF等多种免疫检测实验，是乙肝表面抗原检测与乙肝防控的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）