BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原：HBV感染诊断与窗口期筛查的核心工具
在病毒性肝炎诊断和乙肝防控领域，乙型肝炎病毒核心抗原是病毒核衣壳的核心组分。虽然HBcAg在血清中不游离存在，但针对HBcAg产生的抗-HBc抗体是HBV感染的最早标志，可持续终生，是诊断“窗口期”感染和既往感染的核心指标。生物素标记的小鼠抗HBcAg单克隆抗体将生物素-亲和素信号放大系统与高特异性抗体相结合，是抗-HBc检测与HBV基础研究的核心工具。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原（生物素标记） |
| 宿主来源 | 小鼠 |
| 特异性 | 识别乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg） |
| 标记物 | 生物素（Biotin） |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右 |
| 缓冲液成分 | 50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 保存条件 | -20℃（避光） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 流式细胞术/IF/IP | 1:200-2000 |
| IHC | 1:500-2500 |
| ELISA/Western Blot | 1:2000-20000 |
| 识别范围 | 乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg） |
| 信号放大系统 | 配合HRP/荧光标记的链霉亲和素使用 |
三、产品特点
-
HBcAg特异性——精准识别
特异性识别乙型肝炎病毒核心抗原，是抗-HBc检测和HBV基础研究的核心试剂。 -
生物素标记——信号放大能力强
生物素-亲和素系统是目前最灵敏的信号放大系统之一，可将信号放大数十倍至上百倍。 -
高稀释倍数
ELISA/WB推荐稀释度1:2000-20000，经济耐用。 -
多平台兼容
适用于ELISA、化学发光、Western Blot、免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）等多种检测平台。
四、生物素标记的优势
| 特性 | 说明 |
|---|---|
| 信号放大 | 一个生物素化抗体可结合多个链霉亲和素-HRP，实现信号级联放大 |
| 灵敏度提升 | 比直接HRP标记抗体灵敏度提高5-20倍 |
| 灵活性 | 同一生物素化抗体可配合不同检测系统（HRP、荧光、胶体金） |
五、乙肝核心抗原检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 抗-HBc总抗体检测 | 竞争法检测血清中抗-HBc，判断HBV感染（最早出现的抗体） |
| 抗-HBc IgM检测 | 区分急性感染（IgM阳性）与既往感染 |
| 窗口期感染筛查 | HBsAg转阴后、抗-HBs出现前的“窗口期”，抗-HBc是唯一标志 |
| HBV基础研究 | 检测细胞/组织中HBcAg表达，研究病毒复制 |
| 药物筛选 | 评估抗病毒药物对HBV复制的影响 |
| 肝组织HBcAg检测（IHC） | 判断肝组织中HBV复制活跃程度 |
六、主要应用场景
1. 竞争ELISA法检测抗-HBc总抗体（核心应用）
原理：样品中的抗-HBc抗体与生物素标记的抗HBcAg单抗竞争结合固相载体上的HBcAg。
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被HBcAg（重组抗原） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 预混：待测人血清 + BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原（适量稀释） |
| 4 | 加入预混液至ELISA板，室温1小时 |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | 加TMB显色 |
结果判读：
- OD值低 → 抗-HBc阳性
- OD值高 → 抗-HBc阴性
2. 抗-HBc IgM检测（捕获ELISA法）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗人IgM（μ链特异性）捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入人血清样品（捕获IgM） |
| 4 | 加入HBcAg |
| 5 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原 |
| 6 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 7 | 加TMB显色 |
临床意义：抗-HBc IgM阳性提示急性HBV感染。
3. 双抗体夹心ELISA检测HBcAg（科研应用）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗HBcAg捕获抗体（另一株） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测样品（细胞裂解液、肝组织提取物等） |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原（1:2000-20000稀释） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | 加TMB显色 |
注意：血清中无游离HBcAg，此应用仅限于科研样品。
4. Western Blot检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将HBcAg或含HBcAg的样品进行SDS-PAGE电泳 |
| 2 | 转膜 |
| 3 | 封闭 |
| 4 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原（1:2000-20000稀释） |
| 5 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 6 | ECL化学发光检测 |
预期条带：HBcAg约21kDa。
5. 免疫组化（IHC）——检测肝组织中HBcAg
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 肝组织切片固定、抗原修复 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原（1:500-2500稀释） |
| 4 | 加入HRP-链霉亲和素 |
| 5 | DAB显色 |
临床意义：肝细胞核中HBcAg阳性提示病毒活跃复制。
七、实验操作要点
1. 竞争ELISA方案（检测抗-HBc总抗体）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被HBcAg（重组抗原，2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 预混：待测血清（50μL）+ BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原（50μL，工作浓度） | 预孵育30分钟 |
| 4 | 加入预混液至ELISA板 | 室温1小时（竞争反应） |
| 5 | 洗涤 | 3-5次 |
| 6 | 加入HRP-链霉亲和素 | 按说明书稀释，室温30分钟 |
| 7 | 洗涤 | 3-5次 |
| 8 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 9 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| 竞争ELISA（检测抗-HBc） | 1:2000-1:5000 | 1:1000-1:10000 |
| 夹心ELISA（检测HBcAg） | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| Western Blot | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| IHC | 1:1000 | 1:500-1:2500 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 已知抗-HBc阳性人血清 | 验证竞争抑制效果 |
| 阴性对照 | 抗-HBc阴性人血清 | 评估背景 |
| 特异性对照 | HBsAg/HBeAg阳性血清 | 验证不交叉 |
| 链霉亲和素对照 | 不加生物素化抗体，只加链霉亲和素 | 评估链霉亲和素非特异性结合 |
4. 重要操作提示
- 本产品为生物素标记抗体，必须与链霉亲和素（SA）检测系统配合使用，不可直接显色。
- 抗-HBc是HBV感染的“金标准”标志：出现最早、持续时间最长，是诊断“窗口期”感染的关键指标。
- 血清中无游离HBcAg：本产品用于检测抗-HBc抗体（竞争法）是临床诊断的核心应用，而非直接检测HBcAg。
- HBcAg与HBeAg的关系：两者氨基酸序列有重叠，但本产品为HBcAg特异性，使用前建议验证不识别HBeAg。
- 抗-HBc IgM vs 总抗-HBc：IgM阳性提示急性感染，总抗体阳性不能区分急性与既往感染。
- 生物素-亲和素系统可显著放大信号，适用于低丰度靶标检测。
- 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存 |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 有效期 | 以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用 |
| 环境要求 | 请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效 |
九、常见问题
Q1：BIOTIN-小鼠抗乙肝核心抗原的主要用途是什么？
A1：主要用于竞争ELISA（阻断ELISA） 检测血清中抗-HBc总抗体，也可用于抗-HBc IgM检测（捕获ELISA）和肝组织HBcAg免疫组化检测。是HBV感染诊断、窗口期筛查、急性感染鉴别诊断的核心工具。
Q2：抗-HBc检测的临床意义是什么？
A2：
| 检测结果 | 临床意义 |
|---|---|
| 抗-HBc IgM阳性 | 急性HBV感染 |
| 抗-HBc总抗体阳性、IgM阴性 | 既往感染（曾感染过HBV） |
| 单独抗-HBc阳性 | “窗口期”感染或远期感染（HBsAg已消失，抗-HBs尚未出现） |
Q3：为什么血清中检测的是抗-HBc，而不是HBcAg本身？
A3：HBcAg位于病毒核衣壳内部，不游离存在于血清中，因此无法直接检测。但HBcAg免疫原性极强，感染后抗-HBc出现最早、滴度最高，是HBV感染的可靠标志。
Q4：本产品与抗HBeAg抗体有什么区别？
A4：
| 项目 | 本产品（抗HBcAg） | 抗HBeAg |
|---|---|---|
| 靶抗原 | 核心抗原（核衣壳） | e抗原（分泌型） |
| 检测意义 | 感染标志（最早出现） | 病毒复制、治疗终点 |
| 血清中检测 | 检测抗体（抗-HBc） | 检测抗原（HBeAg）或抗体 |
Q5：如何确定最佳稀释度？
A5：竞争ELISA中，建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:500开始倍比稀释至1:20000，选择与阴性血清OD值差异最大、竞争抑制效果最佳的工作浓度。
Q6：产品如何保存？
A6：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品为生物素标记的小鼠抗乙肝核心抗原抗体，已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好、背景低，适用于竞争ELISA、化学发光、IHC等多种免疫检测实验，是乙肝核心抗体检测与HBV感染诊断的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）