小鼠抗人IgG4单克隆抗体：IgG4相关疾病诊断与亚类检测的核心工具
在临床免疫检测和变态反应研究领域，人IgG4是IgG的四个亚类之一，在IgG4相关性疾病和过敏免疫中具有独特的临床意义。IgG4相关性疾病是一类以血清IgG4水平升高和组织中IgG4阳性浆细胞浸润为特征的纤维炎性疾病，而过敏原特异性IgG4则与免疫耐受和脱敏治疗疗效评估密切相关。小鼠抗人IgG4单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性，成为IgG4相关性疾病诊断与亚类检测的核心工具。
今天，我们以小鼠抗人IgG4单抗（克隆号HG4-2、HG4-11、HG4-26、HG4-29）为例，为您解析这类产品在IgG4相关性疾病诊断与科研中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗人IgG4 |
| 免疫原/特异性 | 人IgG4，不识别IgG1、IgG2、IgG3、IgM、IgA、IgE |
| 单抗克隆号 | HG4-2、HG4-11、HG4-26、HG4-29 |
| 亚类/轻链 | HG4-2、HG4-26：小鼠IgG1，Kappa轻链；HG4-11、HG4-29：小鼠IgG2a，Kappa轻链 |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7，对应蛋白浓度约5mg/mL（具体以标签为准） |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS，pH 7.2，N防腐剂（CMIT/MIT/THYMOL） |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃（或-16℃及以下温度） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 仅识别人IgG4，不识别IgG1、IgG2、IgG3、IgM、IgA、IgE |
| 纯度 | ≥90% |
| 适用平台 | ELISA、免疫亲和层析、Western Blot、免疫组化（IHC）、流式细胞术等 |
三、克隆号及用途一览
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| HG4-2 | 小鼠IgG1 | 夹心法检测（配合HG4-29） |
| HG4-11 | 小鼠IgG2a | 亲和柱制备（捕获纯化人IgG4）；夹心法检测（配合HG4-29） |
| HG4-26 | 小鼠IgG1 | 夹心法检测（配合HG4-29） |
| HG4-29 | 小鼠IgG2a | 亲和柱制备（捕获纯化人IgG4）；夹心法检测（包被抗体） |
四、产品特点
-
IgG4亚类特异性——精准识别
特异性针对人IgG4，不识别IgG1、IgG2、IgG3、IgM、IgA、IgE，确保检测结果的亚类准确性。 -
多克隆号可选——用途灵活
- 亲和柱制备：HG4-11、HG4-29适合固定在琼脂糖微球上，捕获纯化人IgG4
- 夹心法检测：HG4-2或HG4-11配合HG4-29可用于夹心法检测人IgG4
-
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得，批间一致性优异，适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度（≥90%）——背景低
以抗体计纯度不低于90%，非特异性吸附少，实验结果更可靠。 -
多平台兼容
适用于ELISA、免疫亲和层析、Western Blot、免疫组化（IHC）、流式细胞术等多种检测平台。
五、人IgG4检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| IgG4相关性疾病 | 血清IgG4水平升高是诊断核心指标之一 |
| IgG4相关性胰腺炎 | 鉴别诊断自身免疫性胰腺炎与胰腺癌 |
| IgG4相关性肾病 | 辅助诊断和疗效监测 |
| IgG4相关性泪腺炎/涎腺炎 | 血清IgG4检测 |
| 过敏原特异性IgG4 | 评估脱敏治疗（AIT）疗效 |
| 食物过敏 | 监测口服耐受诱导过程中的IgG4变化 |
| B细胞分析 | 流式细胞术检测IgG4阳性B细胞/浆细胞 |
| 治疗性抗体检测 | 检测IgG4型单抗药物 |
六、主要应用场景
1. 双抗体夹心ELISA检测人总IgG4（核心应用）
配对建议：HG4-2或HG4-11（检测抗体标记HRP） + HG4-29（包被抗体）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被HG4-29（2-10μg/mL） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入人血清样品（适当稀释） |
| 4 | 加入HRP标记的HG4-2或HG4-11（按优化稀释度使用） |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 免疫亲和层析——纯化人IgG4
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将HG4-11或HG4-29固定在CNBr活化的琼脂糖微球上 |
| 2 | 装柱、平衡 |
| 3 | 上样人血清或含人IgG4的样品 |
| 4 | 洗涤去除非特异性结合蛋白 |
| 5 | 低pH缓冲液洗脱纯化的人IgG4 |
推荐：HG4-11和HG4-29均适合固定在琼脂糖微球上捕获纯化人IgG4。
3. 流式细胞术——IgG4阳性B细胞/浆细胞检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 分离人外周血单个核细胞（PBMC）或骨髓细胞 |
| 2 | 固定、透化（检测胞内IgG4） |
| 3 | 封闭Fc受体（使用人IgG） |
| 4 | 加入小鼠抗人IgG4单抗（HG4-2/11/26/29） |
| 5 | 加入荧光标记的抗小鼠IgG二抗 |
| 6 | 流式细胞仪检测 |
4. 免疫组化（IHC）/免疫荧光（IF）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 组织切片（如胰腺、泪腺、唾液腺、肾活检）固定、抗原修复 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入小鼠抗人IgG4单抗 |
| 4 | 加入HRP/荧光标记的抗小鼠IgG二抗 |
| 5 | 显色或荧光观察 |
七、实验操作要点
1. 夹心ELISA方案（使用HG4-29包被 + HG4-2-HRP检测）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被HG4-29（2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入人血清样品 | 室温孵育1-2小时，建议稀释1:100-1:1000 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入HRP标记的HG4-2（工作浓度） | 室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 8 | 终止读数 | 450nm |
2. 免疫亲和柱制备方案
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 推荐克隆号 | HG4-11 或 HG4-29 |
| 偶联介质 | CNBr活化Sepharose 4B（或等效产品） |
| 偶联条件 | pH 8.3-8.5，室温偶联2小时或4℃过夜 |
| 偶联效率 | 通常可达80-95% |
| 洗脱条件 | 0.1M甘氨酸-HCl，pH 2.5-3.0 |
3. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始浓度/稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| 夹心ELISA（包被） | 5μg/mL | 2-20μg/mL |
| 夹心ELISA（检测-HRP） | 1:2000 | 1:1000-1:10000 |
| 流式细胞术 | 1:200 | 1:100-1:1000 |
| IHC | 1:200 | 1:100-1:1000 |
| 免疫亲和柱 | 3-5mg/mL介质 | 2-10mg/mL介质 |
4. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 纯化人IgG4或已知高IgG4血清 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 人IgG1/IgG2/IgG3/IgM/IgA/IgE | 验证亚类特异性—应无显著信号 |
| 空白对照 | 无样品 | 评估本底 |
5. 重要操作提示
- 亚类特异性验证：本产品不识别IgG1、IgG2、IgG3、IgM、IgA、IgE，确保检测结果的亚类准确性。
- 亲和柱制备：HG4-11和HG4-29适合固定在琼脂糖微球上捕获纯化人IgG4。
- 夹心法配对：HG4-2或HG4-11配合HG4-29可用于夹心法检测人IgG4。
- IgG4相关性疾病诊断：血清IgG4水平升高需结合临床、影像学和病理学综合判断。
- 请使用正确的实验方法，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存（或-16℃及以下温度） |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放，请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研，不用于诊断 |
九、常见问题
Q1：小鼠抗人IgG4单抗（HG4-2/11/26/29）的主要用途是什么？
A1：主要用于夹心ELISA检测人总IgG4、免疫亲和层析纯化人IgG4，以及流式细胞术、IHC等检测。适用于IgG4相关性疾病诊断、脱敏治疗疗效评估等。
Q2：四个克隆号有什么区别？如何选择？
A2：
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| HG4-2 | IgG1 | 夹心法检测（标记检测抗体） |
| HG4-11 | IgG2a | 亲和柱制备；夹心法检测 |
| HG4-26 | IgG1 | 夹心法检测 |
| HG4-29 | IgG2a | 亲和柱制备；夹心法检测（包被抗体） |
夹心法配对推荐：HG4-29包被 + HG4-2-HRP（或HG4-11-HRP）检测。
Q3：本产品的特异性如何？
A3：本产品仅识别IgG4，不识别IgG1、IgG2、IgG3、IgM、IgA、IgE，确保检测结果的亚类准确性。
Q4：如何验证抗体的亚类特异性？
A4：
- 分别包被人IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA、IgE标准品
- 使用本产品作为一抗进行ELISA检测
- 仅IgG4孔应有显著信号，其他孔应无显著信号
Q5：本产品可以用于IgG4相关性疾病（IgG4-RD）的诊断吗？
A5：可以用于科研检测。血清总IgG4水平**>1.35 mg/mL**是IgG4-RD的参考诊断指标之一，但最终诊断需结合临床、影像学和病理学综合判断。
Q6：产品如何保存？
A6：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。如需长期4℃存放，请联系我们定制。
本产品为抗人IgG4亚类特异性单克隆抗体，特异性高、纯度高、批次稳定，已通过多家客户验证，适用于ELISA、免疫亲和层析、IHC、流式细胞术等多种免疫检测实验，是IgG4相关性疾病诊断与IgG亚类研究的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）