HRP-小鼠抗乙肝核心抗原：HBcAg检测与HBV复制研究的核心酶标工具
在病毒性肝炎诊断和乙肝基础研究领域，乙型肝炎病毒核心抗原是病毒核衣壳的核心组分。虽然HBcAg在血清中不游离存在，但它是HBV复制的重要标志，在肝组织中可被检测，同时也是抗-HBc检测体系中的关键原料。HRP标记的小鼠抗HBcAg单克隆抗体将酶标记技术与高特异性抗体相结合，是HBcAg检测与HBV基础研究的核心工具。
今天，我们以HRP-小鼠抗乙肝核心抗原为例，为您解析这类产品在HBV研究中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | HRP-小鼠抗乙肝核心抗原（HRP标记） |
| 宿主来源 | 小鼠 |
| 特异性 | 识别乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg） |
| 标记物 | HRP（辣根过氧化物酶） |
| 浓度 | 以抗体计1mg/mL左右（以标记物计2mg/mL左右） |
| 缓冲液成分 | 50%甘油、0.01M PBS、0.5%BSA、Proclin-300 |
| 保存条件 | -20℃（避光） |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| ELISA/WB推荐稀释度 | 1:4000-20000 |
| 稀释性能 | 可稀释到数万倍后仍具有使用价值 |
| 起始工作浓度参考 | 1:5000-1:10000（ELISA） |
| 识别范围 | 乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg） |
三、产品特点
-
HRP标记——高灵敏度检测
HRP可实现酶催化信号放大，适合低丰度HBcAg检测。 -
HBcAg特异性——精准识别
特异性识别乙型肝炎病毒核心抗原，是HBV复制研究的重要工具。 -
高稀释倍数——经济耐用
推荐稀释度1:4000-20000，使用得当可稀释到数万倍后仍具有使用价值。 -
多平台兼容
适用于ELISA、Western Blot等检测平台。
四、乙肝核心抗原检测的科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| HBV基础研究 | 检测细胞/组织中HBcAg表达，研究病毒复制 |
| 药物筛选 | 评估抗病毒药物对HBV复制的影响 |
| 抗-HBc检测体系建立 | 作为竞争法检测抗-HBc抗体的标记抗原 |
| 病毒组装研究 | HBcAg是病毒核衣壳的核心组分 |
| Western Blot | 检测重组HBcAg或细胞中HBcAg表达 |
五、主要应用场景
1. 双抗体夹心ELISA检测HBcAg（科研应用）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被抗HBcAg捕获抗体（另一株） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测样品（细胞裂解液、肝组织提取物等） |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗乙肝核心抗原（1:5000-10000稀释） |
| 5 | 加TMB显色 |
注意：血清中无游离HBcAg，此应用仅限于科研样品。
2. 竞争ELISA检测抗-HBc抗体（科研应用）
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被HBcAg（重组抗原） |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 预混：待测血清 + HRP-小鼠抗乙肝核心抗原 |
| 4 | 加入预混液至ELISA板，竞争反应 |
| 5 | 加TMB显色 |
结果判读：
- OD值低 → 抗-HBc阳性
- OD值高 → 抗-HBc阴性
3. Western Blot检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 将HBcAg或含HBcAg的样品进行SDS-PAGE电泳 |
| 2 | 转膜 |
| 3 | 封闭 |
| 4 | 加入HRP-小鼠抗乙肝核心抗原（1:4000-20000稀释） |
| 5 | ECL化学发光检测 |
预期条带：HBcAg约21kDa。
4. 直接ELISA检测HBcAg
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 直接包被待测样品或HBcAg标准品 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入HRP-小鼠抗乙肝核心抗原（1:5000-10000稀释） |
| 4 | 加TMB显色 |
六、实验操作要点
1. 夹心ELISA方案（使用本产品）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被抗HBcAg捕获抗体（另一株，2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入待测样品（细胞裂解液等） | 室温孵育1-2小时 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入HRP-小鼠抗乙肝核心抗原 | 1:5000-10000稀释，室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 8 | 终止读数 | 450nm |
2. 竞争ELISA方案（检测抗-HBc抗体）
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被HBcAg（重组抗原，2-10μg/mL） | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 预混：待测血清 + HRP-小鼠抗乙肝核心抗原 | 预孵育30分钟 |
| 4 | 加入预混液至ELISA板 | 室温1小时（竞争反应） |
| 5 | 洗涤 | 3-5次 |
| 6 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 7 | 终止读数 | 450nm |
3. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| 夹心ELISA | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
| 竞争ELISA | 1:2000-1:5000 | 1:1000-1:10000 |
| Western Blot | 1:5000 | 1:2000-1:20000 |
4. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 重组HBcAg或已知HBcAg阳性样品 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 无HBcAg的缓冲液 | 评估背景 |
| 特异性对照 | HBeAg阳性样品 | 验证不交叉 |
| 空白对照 | 无样品 | 评估本底 |
5. 重要操作提示
- HRP标记：本产品为HRP直接标记，可直接用于ELISA显色，无需使用二抗。
- 血清中无游离HBcAg：本产品主要用于科研样品（细胞、肝组织）中HBcAg的检测，不适用于血清直接检测。
- HBcAg与HBeAg的关系：两者氨基酸序列有重叠，使用前建议验证本产品不识别HBeAg。
- 抗-HBc检测：本产品可用于竞争ELISA检测血清中抗-HBc抗体（科研用途）。
- 请使用正确的稀释液，没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验，否则可能得到错误结果。
七、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存 |
| 分装建议 | 避免反复冻融，建议适当分装后使用 |
| 有效期 | 以产品标签为准；有效期过后很长一段时间仍可使用，但仍建议在有效期内使用 |
| 环境要求 | 请不要在脏乱和强光环境中取用，以免污染和失效 |
八、常见问题
Q1：HRP-小鼠抗乙肝核心抗原的主要用途是什么？
A1：主要用于夹心ELISA检测HBcAg（科研样品）、竞争ELISA检测抗-HBc抗体，以及Western Blot检测HBcAg表达。适用于HBV基础研究、抗病毒药物筛选等。
Q2：本产品可以用于检测血清中的HBcAg吗？
A2：不能。HBcAg位于病毒核衣壳内部，不游离存在于血清中。本产品主要用于科研样品（细胞、肝组织）中HBcAg的检测。
Q3：本产品与HRP-小鼠抗乙肝e抗原有什么区别？
A3：
| 项目 | 本产品（抗HBcAg） | 抗HBeAg |
|---|---|---|
| 靶抗原 | 核心抗原（核衣壳） | e抗原（分泌型） |
| 检测意义 | 感染标志、复制研究 | 病毒复制、治疗终点 |
| 血清中检测 | 不游离存在（检测抗体为主） | 可检测抗原 |
Q4：如何确定最佳稀释度？
A4：建议通过预实验进行滴定：将抗体从1:1000开始倍比稀释至1:20000，以重组HBcAg为阳性对照，选择信噪比最高的稀释度。
Q5：产品如何保存？
A5：请存放于-20℃，避免反复冻融，建议分装保存。有效期以产品标签为准。
本产品为HRP标记的小鼠抗乙肝核心抗原抗体，已通过多家客户验证，灵敏度高、特异性好、背景低，适用于ELISA、Western Blot等多种免疫检测实验，是乙肝核心抗原检测与HBV复制研究的核心工具。如需详细技术参数或样品测试，请与我们联系。
（注：本产品仅用于科学研究，不用于临床诊断。）