小鼠抗人IgE单克隆抗体:过敏性疾病诊断与科研的核心工具
在临床免疫检测和变态反应研究领域,人IgE是介导I型超敏反应的关键免疫球蛋白,其水平升高与过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、食物过敏及寄生虫感染等密切相关。IgE在血清中含量极低(仅占免疫球蛋白总量的0.003%左右),对检测灵敏度要求极高。小鼠抗人IgE单克隆抗体以其高特异性、高纯度和批次稳定性,成为IgE检测与过敏性疾病诊断的核心工具。
今天,我们以小鼠抗人IgE单抗(克隆号HE1、HE2、HE5、HE7)为例,为您解析这类产品在过敏性疾病诊断与科研中的应用价值。
一、产品概述
| 项目 | 参数 |
|---|---|
| 产品名称 | 小鼠抗人IgE |
| 免疫原/特异性 | 人IgE,不识别IgG、IgM、IgA |
| 单抗克隆号 | HE1、HE2、HE5、HE7 |
| 亚类/轻链 | HE1:IgG2a,Kappa;HE2:IgG1,Kappa;HE5:IgG2b,Kappa;HE7:IgG2a,Kappa |
| 制备方法 | 大规模细胞培养法 |
| 蛋白浓度 | OD280吸光值一般为7,对应蛋白浓度约5mg/mL(具体以标签为准) |
| 缓冲液成分 | 0.01M PBS,pH 7.2,N防腐剂(CMIT/MIT/THYMOL) |
| 产品纯度 | 以抗体计不低于90% |
| 保存条件 | -20℃(或-16℃及以下温度) |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
二、核心性能
| 性能指标 | 参数 |
|---|---|
| 特异性 | 识别人IgE,不识别IgG、IgM、IgA |
| 纯度 | ≥90% |
| 适用平台 | ELISA、免疫层析(胶体金/荧光)、Western Blot等 |
三、克隆号及用途一览
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| HE1 | IgG2a | 包被抗体(ELISA、层析法);配合HE5标记用于夹心法检测 |
| HE2 | IgG1 | 包被抗体(ELISA);配合HE5标记用于夹心法检测 |
| HE5 | IgG2b | 标记抗体(HRP、胶体金、量子点荧光微球等);配合HE1或HE2包被用于夹心法检测 |
| HE7 | IgG2a | 仅适合标记单独使用(直接检测) |
推荐配对:HE1包被 + HE5标记(效果优于HE2+HE5组合)
四、产品特点
-
IgE特异性——精准识别
特异性针对人IgE,不识别IgG、IgM、IgA,确保检测结果的准确性和特异性。 -
多克隆号可选——用途灵活
- HE1/HE2:适合包被(ELISA、层析法)
- HE5:适合标记(HRP、胶体金、量子点荧光微球)
- HE7:仅适合标记单独使用
-
单克隆抗体——批次稳定性高
通过大规模细胞培养法获得,批间一致性优异,适合标准化试剂盒开发。 -
高纯度(≥90%)——背景低
以抗体计纯度不低于90%,非特异性吸附少,实验结果更可靠。 -
多平台兼容
适用于ELISA、免疫层析(胶体金/荧光)、Western Blot等多种检测平台。
五、人IgE检测的临床与科研意义
| 应用领域 | 检测意义 |
|---|---|
| 总IgE检测 | 评估过敏体质,辅助诊断过敏性疾病 |
| 过敏原特异性IgE检测 | 识别致敏过敏原(尘螨、花粉、食物等) |
| 过敏性哮喘 | 监测IgE水平,指导抗IgE治疗(如奥马珠单抗) |
| 特应性皮炎 | 评估疾病活动度和治疗反应 |
| 过敏性鼻炎 | 辅助诊断和疗效监测 |
| 食物过敏 | 诊断食物过敏原 |
| 寄生虫感染 | 血清IgE升高提示寄生虫感染可能 |
六、主要应用场景
1. 双抗体夹心ELISA检测人总IgE(核心应用)
推荐配对:HE1包被 + HE5-HRP检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被HE1(2-10μg/mL) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入人血清或标准品 |
| 4 | 加入HRP标记的HE5(按优化稀释度使用) |
| 5 | 加TMB显色 |
2. 过敏原特异性IgE ELISA检测
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被特异性过敏原(如尘螨提取物、花生蛋白) |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入待测人血清 |
| 4 | 加入生物素化HE5 + HRP-链霉亲和素(或HRP标记的HE5) |
| 5 | 加TMB显色 |
3. 免疫层析试纸条(胶体金/荧光)
| 组件 | 说明 |
|---|---|
| 检测线(T线) | HE1包被 |
| 结合垫 | HE5-胶体金或HE5-量子点荧光微球 |
| 质控线(C线) | 抗小鼠IgG抗体 |
配对建议:HE1包被 + HE5标记胶体金/量子点荧光微球,适合层析法快速检测。
4. HE7单独使用(直接检测)
| 步骤 | 操作 |
|---|---|
| 1 | 包被过敏原或抗IgE捕获抗体 |
| 2 | 封闭 |
| 3 | 加入人血清 |
| 4 | 加入HRP标记的HE7(直接检测) |
| 5 | 加TMB显色 |
七、实验操作要点
1. 夹心ELISA方案(HE1包被 + HE5-HRP检测)
| 步骤 | 操作 | 说明 |
|---|---|---|
| 1 | 包被HE1(2-10μg/mL) | 4℃过夜 |
| 2 | 封闭 | 含BSA或脱脂奶粉 |
| 3 | 加入人血清样品 | 室温孵育1-2小时,血清建议稀释1:10-1:100 |
| 4 | 洗涤 | 3-5次 |
| 5 | 加入HRP标记的HE5(工作浓度) | 室温1小时 |
| 6 | 洗涤 | 3-5次 |
| 7 | 加TMB显色 | 15-20分钟 |
| 8 | 终止读数 | 450nm |
2. 稀释度选择建议
| 实验类型 | 建议起始浓度/稀释度 | 优化范围 |
|---|---|---|
| 夹心ELISA(包被HE1) | 5μg/mL | 2-20μg/mL |
| 夹心ELISA(HE5-HRP) | 1:1000 | 1:500-1:5000 |
| 层析法(HE5-标记) | 根据系统优化 | - |
| HE7-HRP直接检测 | 1:1000 | 1:500-1:5000 |
3. 对照设置
| 对照类型 | 组成 | 目的 |
|---|---|---|
| 阳性对照 | 纯化人IgE或已知高IgE血清 | 验证检测体系 |
| 阴性对照 | 人IgG/IgM/IgA标准品 | 验证特异性—应无显著信号 |
| 空白对照 | 无样品 | 评估本底 |
4. 重要操作提示
- IgE在血清中含量极低(正常成人约20-100 IU/mL),对检测灵敏度要求很高。
- 推荐配对:HE1包被 + HE5标记(效果优于HE2+HE5组合)。
- HE7仅适合标记单独使用,不适合作为包被抗体。
- 层析法应用:HE1包被配合HE5标记胶体金或量子点荧光微球适合快速检测。
- 二抗选择:本产品为小鼠IgG,选用抗小鼠IgG二抗时需确保识别相应亚类(HE1为IgG2a,HE2为IgG1,HE5为IgG2b,HE7为IgG2a)。
- 请使用正确的实验方法,没有酶免基础知识的人员不得利用本产品做任何实验,否则可能得到错误结果。
八、保存与使用注意事项
| 项目 | 说明 |
|---|---|
| 保存条件 | -20℃避光保存(或-16℃及以下温度) |
| 分装建议 | 避免反复冻融,建议适当分装后使用 |
| 长期4℃存放 | 如需长期4℃存放,请联系我们定制 |
| 有效期 | 以产品标签为准 |
| 用途限制 | 仅用于科研,不用于诊断 |
九、常见问题
Q1:小鼠抗人IgE单抗(HE1/HE2/HE5/HE7)的主要用途是什么?
A1:主要用于夹心ELISA检测人总IgE或过敏原特异性IgE,以及免疫层析快速检测。适用于过敏性疾病诊断、过敏原筛查、抗IgE治疗效果监测等。
Q2:四个克隆号有什么区别?如何选择?
A2:
| 克隆号 | 亚类 | 推荐用途 |
|---|---|---|
| HE1 | IgG2a | 包被抗体(ELISA、层析法) |
| HE2 | IgG1 | 包被抗体(ELISA) |
| HE5 | IgG2b | 标记抗体(HRP、胶体金、荧光微球) |
| HE7 | IgG2a | 仅适合标记单独使用 |
推荐配对:HE1包被 + HE5标记(效果最佳)。
Q3:本产品的特异性如何?
A3:本产品仅识别IgE,不识别IgG、IgM、IgA,确保检测结果的准确性。
Q4:为什么检测IgE需要高灵敏度系统?
A4:人血清中IgE含量极低,仅占免疫球蛋白总量的约**0.003%**(正常成人约20-100 IU/mL)。本产品的高特异性和高亲和力抗体组合可满足高灵敏度检测需求。
Q5:HE7克隆有什么特殊用途?
A5:HE7仅适合标记单独使用,不适合作为包被抗体。可用于直接检测体系。
Q6:如何确定最佳稀释度?
A6:建议通过预实验进行滴定:包被抗体从1μg/mL开始倍比稀释至20μg/mL,标记抗体从1:500开始倍比稀释至1:10000,选择信噪比最高的稀释度。
Q7:产品如何保存?
A7:请存放于-20℃,避免反复冻融,建议分装保存。如需长期4℃存放,请联系我们定制。
本产品为抗人IgE特异性单克隆抗体,特异性高、纯度高、批次稳定,已通过多家客户验证,适用于ELISA、免疫层析等多种免疫检测实验,是过敏性疾病诊断的核心工具。如需详细技术参数或样品测试,请与我们联系。
(注:本产品仅用于科学研究,不用于临床诊断。)
